淋巴細胞分離液

產品簡介：

人血中紅細胞和白細胞等細胞密度較大，為1.090g/ml左右，淋巴細胞和單核細胞密度為1.075~1.090g/ml，血小板為1.030~1.035g/ml，本產品為密度在 1.077 g/mL 并且與外周全血等滲的溶液（分離液），經過密度梯度離心，使一定密度的細胞按照相應密度梯度分布，從各種血細胞中分離出淋巴細胞。

本產品收集細胞的得率大于80%。

使用方法：

常規實驗操作方法：

1、取新鮮抗凝血2ml，用等體積PBS或Hank’s液混勻。

2、在離心管中加入3ml分離液，小心將稀釋后的血樣平鋪到分離液液面上方。

3、離心 400 g，30-40 min。

4、離心結束后，此時離心管中由上至下細胞分四層：第一層為血漿層，第二層為環狀乳白色淋巴細胞，第三層為透明分離液層，第四層為紅細胞層。

5、小心吸取第二層細胞到另一離心管中，加入三倍體積的PBS或Hank’s液混勻，60-100g，離心 10min，棄上清。以0.5ml后續實驗所需相應液體重懸目的細胞。

注：血液樣品量增大時，可通過改變離心管直徑的方法始終保持樣本量高度與分離液高度為2、4cm 與3cm，其他分離條件不變。

為滿足客戶實際使用需求，不同血液樣本量推薦具體實驗操作方法詳見說明書。

注意事項：

1、全過程樣本、試劑及實驗環境均需在20±2℃的條件下進行。為獲得最佳的實驗結果，最好在取血2h 內進行實驗，血液存放時間越長，細胞分離效果越差。血液放置超過6h后分離效果更差甚至不能達到分離目的。

2、本實驗最好不要使用高聚合材質（如聚苯乙烯）的塑料制品，應使用無靜電、低靜電離心管及未經堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面，影響細胞分離效果。

3、吸取過多的淋巴細胞層及分離液層會導致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細胞數量增加。

4、吸取過多的淋巴細胞層上層溶液會導致血漿蛋白及血小板混雜。

5、當血液樣本粘度過高需稀釋時，最優稀釋方法：將血液與PBS或 Hank’s液混勻備用。注：不當的稀釋方法會降低細胞得率及活性。如血液樣本經過稀釋則分離過程中需適當降低離心力和離心時間。

7、 因血液樣本的個體差異及血液粘度不同，需調整離心力及離心時間，離心力最大不超過1000g。

保存條件：

常溫保存，有效期2 年。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟封后置常溫保存。如4℃保存，本分離液易出現白色結晶，影響分離效果。